
标题: Proteinase K Dilution Buffer 小麦财经股票配资
一、化学试剂的基本信息
保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融
英文名称:Proteinase K Dilution Buffer
中文名称:蛋白酶K稀释缓冲液
运输:低温运输
保质期:12个月
规格标准:该试剂的纯度通常达到95%以上,规格包括1mg、5mg、10mg等,也可按需包装。
生产信息:新研博美
二、基本定义
Proteinase K Dilution Buffer 是专门用于溶解冻干蛋白酶K(Proteinase K)或稀释其浓缩液以制备工作液的缓冲液体系。它的主要作用是为蛋白酶K提供适宜的pH环境和离子条件,以维持其高酶活性和稳定性,防止酶在溶解或储存过程中失活。
结构组成
虽然不同厂商的配方可能略有差异,但标准的蛋白酶K稀释缓冲液通常包含以下核心成分:
缓冲体系 (Buffer System):
Tris-HCl:是最常用的缓冲剂,用于维持pH值。
pH值:通常设定在 pH 7.4 – 8.0 之间(最佳工作pH范围约为7.5–8.5)。这是蛋白酶K活性最高的pH区间。
钙离子 (Ca²⁺):
通常添加 1 mM CaCl₂ (氯化钙)。
作用:钙离子对于维持蛋白酶K的三维结构至关重要,能有效防止酶发生自水解(autolysis)并提高其热稳定性。若去除钙离子,酶活性可能下降约80%。
稳定剂/防冻剂 (可选):
部分商业缓冲液或长期储存液配方中可能含有 50% 甘油 (Glycerol),用于防止反复冻融导致的酶失活,并作为冷冻保护剂。但在使用前稀释工作液时,甘油浓度通常较低或不包含甘油(取决于具体实验需求)。
其他添加剂 (视特定配方而定):
某些特殊配方的稀释缓冲液可能含有微量 NaCl 以调节离子强度,或含有微量 EDTA(需注意:EDTA会螯合钙离子,因此含EDTA的缓冲液通常不适合作为稀释缓冲液,除非酶制剂本身已高度稳定,或者配方经过特殊调整;大多数稀释缓冲液明确不含EDTA或EDTA含量极低)。
部分配方可能包含少量非离子去垢剂(如Nonidet P-40),以帮助溶解蛋白并维持其结构,但这更常见于反应缓冲液而非单纯的稀释液。
三、功能特性
维持pH稳定性:Tris-HCl缓冲体系确保酶处于其最适pH环境,防止因溶剂pH波动导致酶失活。
增强热稳定性:通过引入Ca²⁺,缓冲液显著提高酶在较高温度(如50–60℃)下的稳定性,使其能耐受较长的孵育时间。
防止自降解:钙离子的存在抑制了蛋白酶K的自身水解(autolysis),延长了酶的使用寿命。
广谱兼容性:配制后的蛋白酶K工作液在含有SDS、尿素、EDTA(需控制浓度)、去垢剂等变性剂的实验体系中仍能保持活性。
快速溶解:该缓冲液能有效溶解冻干粉,避免酶蛋白聚集沉淀。
优势
高活性:在适宜pH和Ca²⁺存在下,酶活性达到峰值,能迅速高效地降解蛋白质。
稳定性强:相比在水或普通缓冲液中溶解,使用专用稀释缓冲液可保持酶活性的长期稳定,减少反复冻融带来的损失。
操作简便:商业化的稀释缓冲液通常经过优化,用户可直接使用,无需自行调配复杂的pH和离子强度。
广谱底物特异性:配合该缓冲液使用的蛋白酶K能切割疏水性氨基酸(如甲硫氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等)侧面的肽键,可降解绝大多数蛋白质,包括核酶和蛋白酶。
耐受变性剂:即使在含有强变性剂(如SDS、尿素)的体系中,酶依然保持活性,非常适合复杂样品(如组织、血液)的裂解。
四、新研博美目录列表:
BODIPY 530/550 IA
DBCO-PEG13-DBCO
N-(3-OHpropyl) phthalimide-PEG-OH
Hydrazide-PEG-glutaric acid
DBCO-CONH-PEG4-Maleimide
DBCO-PEG8-Maleimide
tBOC-N-amido-PEG-CH2COOH
CHO-PEG-P2VP,Aldehyde-PEG-P2VP
CHO-PEG-Ornithine
DBCO-NHCO-PEG6-Biotin
DBCO-SS-Maleimide
ATTO Rho6G maleimide
ATTO Rho3B maleimide
TAMRA maleimide, 6-isomer
Methyltetrazine-PEG4-maleimide
Rhod-5N AM,Cell Permeant 钙离子荧光探针
Cal-590 AM,Cell Permeant 钙离子荧光探针
温馨提示:
试剂仅用于科研实验小麦财经股票配资,不可用于人体~~~~~编辑作者:陕西新研博美木南
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